In dieser Arbeit wurde ein HLA-DPB1*03:01 spezifischer T-Zell-Rezeptor (11G1-TZR) im Kontext der adoptiven Immuntherapie bei akuter myeloischer Leukämie charakterisiert. Bei der Isolation der DNA des TZR wurden zwei verschiedene α-Ketten isoliert. Im ersten Teil der Arbeit konnte die funktionelle Kettenpaarung (α8-3- und β-Kette) identifiziert werden.
In weiteren Versuchen zeigte sich, dass CD4+ und CD8+ T-Zellen gesunder Spender, die mit dem 11G1-TZR transfiziert wurden, in der Lage sind HLA-DPB1*03:01+ AML-Blasten in vitro spezifisch zu erkennen.
Im nächsten Schritt wurde eine chimäre Form des 11G1-TZR funktionell getestet, wodurch eine verbesserte Oberflächenexpression erzielt werden konnte. Auch im Hinblick auf Erkennung und Lyse von AML-Blasten konnte durch die Murinisierung der Gensequenz des Rezeptors die Funktionalität der transfizierten T-Zellen erhöht werden.
Experimente mit Fibroblasten und weiteren GvHD-Modellzellreihen zeigten, dass der 11G1-TZR auch nicht-hämatopoetische Zellen erkennen kann. Eine Erhöhung der Expression des 11G1-TZR (z.B. durch die Chimärisierung) oder eine höhere Oberflächenexpression von HLA-DP (Elektroporation der Zielzellen statt Behandlung mit IFN-γ) führen zu einer spezifischen T-Zell-Aktivierung. Eine Hämatopoese-Spezifität des 1G11-TZR liegt somit nicht vor, weshalb bei klinischer Anwendung des 11G1-TZR das Risiko eine GvHD zu induzieren besteht.
Im Zusammenhang mit der HLA-DP-Expression der Zielzellen wurde auch die Frage aufgeworfen, wie in vitro ein möglichst realistisches Entzündungsmilieu simuliert werden kann. Es besteht die Möglichkeit, dass durch die Elektroporation von HLA-DP unphysiologisch hohe Expressionsfrequenzen von HLA-DP erreicht werden und die Behandlung mit IFN-γ besser geeignet ist, um entzündetes Gewebe im menschlichen Körper in vitro nachzubilden.
Zur besseren Abschätzung des GvHD-Risikos des 11G1-TZR sind weitere Versuche in vivo notwendig. Vor einer klinischen Anwendung müssten im Tiermodell eine gute Verträglichkeit und Effektivität bestätigt werden.

The goal of this thesis was to characterize a HLA-DPB1*03:01 specific T cell receptor (11G1 TCR) in the context of adoptive immunotherapy for acute myeloid leukemia.
Previously a HLA-DPB1*03:01+ T cell clone (11G1) could be isolated. First experiments with this clone showed a possible hematopoiesis specifity in recognition. The DNA of the 11G1 TCR was isolated and two different α-chain variants were found. In the first part of this thesis the functional combination of α8-3 and β-chain could be identified.
It could be shown that CD4+ und CD8+ T cells, that were transfected with the 11G1 TCR, were able to recognize AML blasts HLA-DP specific in vitro.
The next step was to develop a chimeric 11G1 TCR, which led to a higher surface expression of the TCR. Lysis and recognition was also enhanced after murinization.
Experiments with fibroblasts and other GvHD model cell lines showed that the 11G1-TCR can also recognize non hematopoetic cells. Increased surface expression of the TCR (11G1chim) or HLA-DP (Electroporation instead of treatment with IFN-γ) lead to a specific T cell reaction. This means that the 11G1-TCR is not hematopoiesis specific and a 11G1 T cell based treatment could cause GVHD.
Another question that was raised was which methods of inducing a HLA-DP expression are suitable for in vitro tests. With electroporation surface expression was much higher than with IFN-γ treatment.
To better evaluate the risk of a GVHD with the 11G1 TCR, experiments in animal models are needed to test safety and efficacy of T cells transfected with the 11G1-TCR.