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Cis- und trans-wirksame Elemente der latenten Replikation des Epstein-Barr-Virus

URN to cite this document: urn:nbn:de:bvb:355-opus-1377

Uhlig, Jörg (2003) Cis- und trans-wirksame Elemente der latenten Replikation des Epstein-Barr-Virus. PhD, Universität Regensburg

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Abstract (German)

Die Replikation des Epstein-Barr-Virus (EBV) wird als Modellsystem für die chromosomale Replikation höherer Eukaryontenzellen angesehen. Die für die Replikation des Virus verantwortliche Einheit, der oriP, enthält drei Nonamersequenzen, die den Telomeren der Säugetierchromosomen homolog sind. Daraus wurde geschlossen, daß möglicherweise die Telomerase, die mit ihrer RNA-Untereinheit an Telomere zu binden vermag, eine wesentliche Rolle bei der Initiation der Replikation spielen könnte. Mittels Transfektion verschiedener Genexpressionsvektoren latenter Gene des EBV in unterschiedliche Zelllinien wurde untersucht, ob diese Gene die normalerweise strikt abgeschaltete Telomerase, die in durch EBV verursachten Tumoren sehr stark exprimiert wird, reaktivieren können. Dazu wurde nach Transfektion die Telomeraseaktivität durch einen TRAP-Assay, die -expression mittels RNase-Protection-Assay und die -promotoraktivität mit einem Luciferase-Assay gemessen. Eine Erhöhung dieser Parameter konnte nicht dargestellt werden, allerdings mögliche Vorstufen, die zur Immortalisierung führen können.
Weiterhin wurde ein als funktionell beschriebenes neues Element am oriP, das rep*-Element, charakterisiert und mittels in-vivo-footprinting auf Funktionalität überprüft. Die Nichtbedeckung mit Proteinen macht eine funktionelle Rolle dieses Elements bei der Replikation allerdings unwahrscheinlich.

Translation of the abstract (English)

The replication of the Epstein-Barr-Virus (EBV) is taken as a model for the replication of higher developed cells. Responsible for the initiation of viral replication is an element called oriP, which contains three nonamer sequences which are homologous to the telomeres of vertebrate chromosomes. So was concluded that telomerase which can bind with its RNA subdomaine to telomer sequences perhaps plays a potential role in the initiation of replication and is reactivated by viral latent proteins. EBV is a tumor causing virus. In tumors caused by EBV telomerase is very active. In this study expression plasmids containing viral latent genes were transfected in different cell lines and the effect to telomerase activity, expression and activity of the telomerase promotor was measured by a TRAP-, a RNase-protection- and a luciferase-assay. No change of these parameters was observed but some effects which could lead to reactivation of the telomerase.
Additional to that an element called rep* which was discribed as a functional element was characterised via in vivo footprinting experiments. It proofed out that there is no protein binding at this element, so a functional part of this element in replication seems to be unlikely.

Item Type:

Thesis of the University of Regensburg (PhD)

Referee:

Hans Wolf

Date of exam:

16 October 2002

Institutions:

Biology, Preclinical Medicine > Institut für Physiologie > Prof. Dr. Armin Kurtz

Classification: