Die Rolle des NK1R unter dem Einfluss von Fluid Flow Shear Stress in murinen Osteozyten

Item type:	Thesis of the University of Regensburg (PhD)
Open Access Type:	Primary Publication
Date:	26 August 2022
Referee:	Prof. Dr. Susanne Grässel
Date of exam:	14 July 2022
Institutions:	Medicine > Lehrstuhl für Orthopädie
Keywords:	NK1R, Fluid Flow Shear Stress, MLO-Y4, osteocyte, bone remodeling, mechanoreception
Dewey Decimal Classification:	600 Technology > 610 Medical sciences Medicine
Status:	Published
Refereed:	Yes, this version has been refereed
Created at the University of Regensburg:	Yes
Item ID:	52798

Abstract (German)

In Chondrozyten und auch in Tenozyten zeigte sich, dass der NK1R als zentraler Mechanorezeptor fungiert und unter anderem auch wesentlich die endogene Produktion von SP und die Zellproliferation beeinflussen kann. Ebenfalls bekannt ist, dass Osteozyten den NK1R exprimieren und es gibt Hinweise, dass er an der Regulation der Knochenstruktur nach Belastung beteiligt ist. Um die Effekte, die durch ...

Abstract (German)

In Chondrozyten und auch in Tenozyten zeigte sich, dass der NK1R als zentraler Mechanorezeptor fungiert und unter anderem auch wesentlich die endogene Produktion von SP und die Zellproliferation beeinflussen kann. Ebenfalls bekannt ist, dass Osteozyten den NK1R exprimieren und es gibt Hinweise, dass er an der Regulation der Knochenstruktur nach Belastung beteiligt ist. Um die Effekte, die durch FFSS in Osteozyten bewirkt werden analysieren zu können, wurde in der vorliegenden Arbeit zunächst eine Methode entwickelt, die es ermöglichte, Zellen der murinen Osteozytenzelllinie MLO-Y4 einem FFSS auszusetzten. Dazu wurde ein Pumpensystem etabliert und die Zellen einem FFSS über einen Zeitraum von 2 Stunden ausgesetzt. Anschließend wurde mittels qRT-PCR untersucht, wie Osteozyten nach FFSS Belastung die Genexpression bestimmter anaboler und kataboler Modulatoren des Knochenremodelings regulieren und welchen Einfluss die Stärke des FFSS auf die Expression der Neuropeptide SP und αCGRP sowie der dazugehörigen Rezeptoren hat.
In Vorbereitung für zukünftige Forschungsprojekte der Arbeitsgruppe wurde versucht zwei Zellklone von MLO-Y4-Osteozyten zu generieren, die jeweils eine der NK1R-Isoformen (NK1R-F oder NK1R-T) überexprimieren, sodass in zukünftigen Projekten Rezeptoreffekte differenziert nach der Unterart des Rezeptors betrachtet werden können

Translation of the abstract (English)

To examine the effects of FFSS on osteocytes, a method was established that enabled it to expose murine osteocytes of the MLO-Y4 cell line to Fluid Flow Shear Stress. A pump system was used and the cells were 2 hours exposed to FFSS. Later on qRT-PCR was used to investigate whether osteocytes responded to FFSS by regulating certain anabolic or catabolic genes that play a crucial role in bone ...

Translation of the abstract (English)

To examine the effects of FFSS on osteocytes, a method was established that enabled it to expose murine osteocytes of the MLO-Y4 cell line to Fluid Flow Shear Stress. A pump system was used and the cells were 2 hours exposed to FFSS. Later on qRT-PCR was used to investigate whether osteocytes responded to FFSS by regulating certain anabolic or catabolic genes that play a crucial role in bone remodeling. Moreover, the influence of different stress levels of FFSS on the expression of the neuropeptides SP and αCGRP and their receptors was examined.
Furthermore it was tried to establish MLO-Y4 cell clones, which over express one of the isoforms of the NK1R so that in future researches these cells could be used to examine differences in generegulations considering the different NK1R-isoforms.

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