Ziel dieser Studie war es, ein in vitro Modell, das die Wirksamkeit von Desinfektionsmitteln, in artifiziell infizierten Wurzelkanälen testet, zu entwickeln. Die Tauglichkeit des Modells sollte mit Natriumhypochlorit (NaOCl), mit und ohne Desinfektionsstop durch Natriumthiosulfat (Na2S2O3), gezeigt werden.
Wurzeln boviner Frontzähne wurden horizontal in drei Teile geschnitten und in Medium (TBS) ...
Abstract (German)
Ziel dieser Studie war es, ein in vitro Modell, das die Wirksamkeit von Desinfektionsmitteln, in artifiziell infizierten Wurzelkanälen testet, zu entwickeln. Die Tauglichkeit des Modells sollte mit Natriumhypochlorit (NaOCl), mit und ohne Desinfektionsstop durch Natriumthiosulfat (Na2S2O3), gezeigt werden. Wurzeln boviner Frontzähne wurden horizontal in drei Teile geschnitten und in Medium (TBS) autoklaviert (121°C, 25min). Jedes apikale Stück wurde in eine extra Petri Schale geklebt (RelyX Unicem,3MEspe), die Kanäle mit sterilem Medium befüllt. Das mittlere und cervicale Stück wurden in eine Petri Schale geklebt (RelyX Unicem), die Kanäle mit E. faecalis (ATCC 29212) befüllt. Alle drei Stücke wurden auf einem Rüttler inkubiert (7 Tage, 37°C). Die apikalen Stücke dienten als Sterilkontrollen, das Mittlere als Infektionskontrolle. Das cervicale Stück wurde mit der Testsubstanz (NaOCl (0,5%;1,0%;3,0%) für 30sec bzw. 10min) befüllt. Die Kanallumina der Hälfte der cervicalen Stücke wurden nach Desinfektion für 30 sec mit Na2S2O3 gefüllt, für den Desinfektionsstop. Alle Stücke wurden ihrer Länge nach gespalten. Bohrproben in Tiefen von 0,5mm, 1,0mm und 1,5mm wurden mit Rosenbohrern (0,8mm) aus den Kanalwänden entnommen. Die gewonnenen Dentinspäne wurden ausplatiert (TSA), inkubiert (24h, 37°C). Die koloniebildenden Einheiten (CFU) wurden von 10 Stichproben pro Untersuchungsgruppe gezählt. Die Desinfektion wurde als biologisch relevant betrachtet (brd), wenn eine Reduktion um mindestens drei log10-Stufen erfolgte. Ergebnisse: Die Sterilkontrollen zeigten kein Wachstum. Die Infektionskontrollen wiesen CFU zwischen 8�103 und 9�104 auf. Alle gestoppten Kontrollen wiesen Wachstum auf. Das vorliegende System erkannte die klinisch bekannten Effekte von NaOCl. Es kann damit für die Testung antibakterieller Flüssigkeiten als geeignet angesehen werden. Jedoch scheint es zur Untersuchung zeitabhängiger Effekte von Desinfektionsmitteln notwendig, deren Wirkung zu stoppen.
Translation of the abstract (English)
Aim:
The aim of the study was to develop an in vitro method for testing the efficacy of liquid antimicrobials in artificially infected root canals and to evaluate its suitability investigating sodium hypochlorite (NaOCl) with and without stopping disinfection by sodium thiosulphate (Na2S2O3).
Materials and Methods:
Roots from bovine incisors were cut horizontally into three parts and autoclaved ...
Translation of the abstract (English)
Aim: The aim of the study was to develop an in vitro method for testing the efficacy of liquid antimicrobials in artificially infected root canals and to evaluate its suitability investigating sodium hypochlorite (NaOCl) with and without stopping disinfection by sodium thiosulphate (Na2S2O3).
Materials and Methods: Roots from bovine incisors were cut horizontally into three parts and autoclaved (121°C;25min) in Tryptic-Soy-Broth (TBS). Apical parts were fixed (RelyX Unicem;3MEspe) in extra Petri dishes, canals were filled with sterile medium. Cervical and median parts were fixed (RelyX Unicem) in a Petri dish, canals were filled with Enterococcus faecalis (ATCC29212) suspension. All three parts were covered with glass plates and incubated (7days;37°C) on a shaker. Apical parts were used as sterility controls. Median parts served as maximium bacterial-growth-controls, coronal parts were filled with test substances (NaOCl (0.5%; 1.0%; 3.0%), immersion periods 30s; 10min), half of the coronal specimen were filled with Na2S2O3 after disinfection to stop action. Specimens were cut along long axis into halves and kept in saline. Biopsies of 0.5mm,1.0mm and 1.5mm depth were taken from root canal walls perpendicular to their surfaces (sterile round bur;0.8mm). Resulting dentin chips and the bur were vortexed (2ml medium;5sec), plated on TSA, incubated (24h;37°C), and colony-forming units (CFU) were counted. Experimental groups comprised 10 samples. Disinfection was considered biologically relevant (brd), if the reduction of CFU was at least three log10-orders of magnitude.
Results: Sterility controls showed zero CFU indicating an aseptic procedure. Growth-controls showed CFU from 8�103 to 9�104, indicating an effective artificial infection. All stopped controls showed CFU.
Conclusions: The in vitro test system presented revealed known clinical effects of NaOCl. Thus, it may be suitable for testing liquid antimicrobials. However, for testing time-dependent effects in vitro, it seems appropriate to stop the disinfection process.
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