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Biochemische Charakterisierung des archäellen Argonaute-Proteins aus Methanocaldococcus jannaschii und strukturelle Untersuchungen mit Einzelmolekül-Förster-Resonanz-Energie-Transfer-Studien
Zander, Adrian (2018) Biochemische Charakterisierung des archäellen Argonaute-Proteins aus Methanocaldococcus jannaschii und strukturelle Untersuchungen mit Einzelmolekül-Förster-Resonanz-Energie-Transfer-Studien. PhD, Universität Regensburg.Date of publication of this fulltext: 01 Mar 2018 09:11
Thesis of the University of Regensburg
DOI to cite this document: 10.5283/epub.36759
Abstract (German)
In dieser Arbeit werden Methoden zur Expression von des archäellen Argonaute-Proteins aus Methanocaldococcus jannaschii mit nachfolgender Reinigung beschrieben. Es werden anschließend Verfahren zur Untersuchung der Bindungsfähigkeit, Nukleaseaktivität, Einbringung unnatürlicher Aminosäuren in das Protein während der rekombinanten Expression, ortsspezifischen Markierung des Proteins mit ...
In dieser Arbeit werden Methoden zur Expression von des archäellen Argonaute-Proteins aus Methanocaldococcus jannaschii mit nachfolgender Reinigung beschrieben. Es werden anschließend Verfahren zur Untersuchung der Bindungsfähigkeit, Nukleaseaktivität, Einbringung unnatürlicher Aminosäuren in das Protein während der rekombinanten Expression, ortsspezifischen Markierung des Proteins mit Fluoreszenzfarbstoffen und darauf aufbauenden Einzelmolekül-Förster-Resonanz-Energie-Transfer-Studien gezeigt. Daraus folgend wird beschrieben, welche potentielle biologische Rolle dieses Protein in der Zelle einnehmen kann, basierend auf der Prozessierung langkettiger, doppelsträngiger DNA.
Translation of the abstract (English)
In this thesis methods for expression and subsequent purification of the archaeal Argonaute protein from Methanocaldococcus jannaschii are described. In addition, methods for investigation of binding capability, nuclease activity, Integration of unnatural amino acids while recombinant expression of the protein, site-specific labeling of the protein using fluorescence dyes and following up single ...
In this thesis methods for expression and subsequent purification of the archaeal Argonaute protein from Methanocaldococcus jannaschii are described. In addition, methods for investigation of binding capability, nuclease activity, Integration of unnatural amino acids while recombinant expression of the protein, site-specific labeling of the protein using fluorescence dyes and following up single molecule Förster resonance energy transfer studies are shown. By this, a potential biological function of this protein in the cell can be speculated, based on the processing of long chain, double stranded DNA.
Involved Institutions
Details
| Item type | Thesis of the University of Regensburg (PhD) |
| Open Access Type: | Primary Publication |
|---|---|
| Date | 1 March 2018 |
| Referee | Prof. Dr. Dina Grohmann |
| Date of exam | 20 November 2017 |
| Institutions | Biology, Preclinical Medicine > Institut für Biochemie, Genetik und Mikrobiologie Biology, Preclinical Medicine > Institut für Biochemie, Genetik und Mikrobiologie > Lehrstuhl für Mikrobiologie (Archaeenzentrum) > Prof. Dr. Dina Grohmann |
| Keywords | Argonaute; Archaea; FRET; single molecule; nuclease; |
| Dewey Decimal Classification | 500 Science > 570 Life sciences |
| Status | Published |
| Refereed | Yes, this version has been refereed |
| Created at the University of Regensburg | Yes |
| URN of the UB Regensburg | urn:nbn:de:bvb:355-epub-367597 |
| Item ID | 36759 |
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