Untersuchungen zur gewebsspezifischen Expression von ASB10 in der Maus – Eine Reportergenanalyse - Publikationsserver der Universität Regensburg

Dokumentenart:	Hochschulschrift der Universität Regensburg (Dissertation)
Open Access Art:	Primärpublikation
Datum:	2 März 2021
Begutachter (Erstgutachter):	Prof. Dr. Ernst R. Tamm
Tag der Prüfung:	2 Februar 2021
Institutionen:	Biologie und Vorklinische Medizin > Institut für Anatomie > Lehrstuhl für Humananatomie und Embryologie > Prof. Dr. Ernst Tamm
Stichwörter / Keywords:	ASB10, Glaukom, Expression
Dewey-Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften > 610 Medizin
Status:	Veröffentlicht
Begutachtet:	Ja, diese Version wurde begutachtet
An der Universität Regensburg entstanden:	Ja
Dokumenten-ID:	45098

Zusammenfassung (Deutsch)

Hintergrund: Bei ASB10 handelt es sich um ein möglicherweise mit dem Glaukom assoziiertes Gen. Die Funktion von ASB10 liegt vermutlich in der Ubiquitinierung eines spezifischen Substrates, somit ist es Bestandteil zellulärer Abbauprozesse. In dieser Arbeit soll die Expression von ASB10 im Versuchsorganismus Maus (adult und embryonal) dargestellt werden. Methoden: Es wurde eine ASB10+/--Mauslinie ...

Zusammenfassung (Deutsch)

Hintergrund: Bei ASB10 handelt es sich um ein möglicherweise mit dem Glaukom assoziiertes Gen. Die Funktion von ASB10 liegt vermutlich in der Ubiquitinierung eines spezifischen Substrates, somit ist es Bestandteil zellulärer Abbauprozesse. In dieser Arbeit soll die Expression von ASB10 im Versuchsorganismus Maus (adult und embryonal) dargestellt werden.
Methoden: Es wurde eine ASB10+/--Mauslinie verwendet, bei welcher eine promotergesteuerte LacZ-Kassette in das ASB10-Gen eingeschoben wurde. Somit konnte die Genexpression mittels einer LacZ-Färbung von Gefrierschnitten der einzelnen Organe sichtbar gemacht werden.
Zudem wurden Kaiserschnitte von trächtigen Mäusen und anschließend LacZ-Färbungen der Embryonen durchgeführt, um die Expression von ASB10 im embryonalen Stadium zu zeigen.
Ergebnisse: Es zeigte sich eine nahezu ubiquitäre Expression von ASB10 im embryonalen sowie im adulten Organismus der Maus. Die Intensität der durchgeführten LacZ-Färbung zeigt eine deutliche Varianz zwischen den einzelnen Organen, am stärksten ausgeprägt ist sie in Myokard, Nierenparenchym und Nervengewebe, kaum bis gar nicht vorhanden ist die Färbung in Skelettmuskulatur, Thymus- und Leberparenchym, die weiteren Organe zeigen eine intermediäre Intensität der Färbung. Dies kann sowohl auf eine unterschiedliche Expression von ASB10 in den einzelnen Organen als auch auf eine unterschiedliche Verteilung des Substrates bzw. der Substrate von ASB10 zurückzuführen sein.
Zudem zeigte sich auch bei Genotypisierung der Embryonen kein homozygoter ASB10-/--Genotyp, sodass von einer Letalität der homozygoten ASB10-Defizienz in einem frühen embryonalen Stadium ausgegangen werden muss.
Schlussfolgerung: Die gezeigte ubiquitäre Expression von ASB10 steht im Einklang mit der Hypothese, dass ASB10 an der Ubiquitinierung und damit an zellulären Abbauprozessen beteiligt ist. Bezüglich der Bedeutung von ASB10 als ein mit dem Glaukom assoziiertes Gen kann durch die Ergebnisse der vorliegenden Arbeit jedoch noch keine präzise Aussage getroffen werden.

Übersetzung der Zusammenfassung (Englisch)

Background: ASB10 is a gene potentially associated with glaucoma. Its function is hypothesised to be the ubiquitination of a specific substrate, which makes it a part of intracellular degradation processes. The aim of this study was to analyse the expression of ASB10 within the adult and embryonal murine organism. Methods: We used a genetic line of ASB10+/--mice, in which a promoter-driven ...

Übersetzung der Zusammenfassung (Englisch)

Background: ASB10 is a gene potentially associated with glaucoma. Its function is hypothesised to be the ubiquitination of a specific substrate, which makes it a part of intracellular degradation processes. The aim of this study was to analyse the expression of ASB10 within the adult and embryonal murine organism.
Methods: We used a genetic line of ASB10+/--mice, in which a promoter-driven LacZ-cassette had been inserted in the ASB10-gene. Therefore the expression of ASB10 could be visualised by LacZ-staining of cryo-sections of the individual organs and tissues. In addition, C-sections of pregnant female mice and consecutive LacZ-staining of the embryos were performed so as to analyse the expression of ASB10 in the embryonal state.
Results: The analyses showed an almost ubiquitous expression of ASB10 in the embryonal and the adult murine organism. The intensity of the LacZ-staining showed a considerable variance between the individual organs and tissues. The staining was most intense in the myocardium, the renal parenchyma and neural tissue, while skeletal muscle tissue as well as thymus and hepatic parenchyma showed a faint staining or none at all. The remaining organs and tissues showed a LacZ-staining of intermediate intensity. This might be due to a variable expression of ASB10 within the separate organs and tissues as well as a variable distribution of the substrate (or the substrates) of ASB10. In addition, when examining the genotypes of the murine embryos, no homozygote ASB10-/--genotype could be found, which might be due to lethality of a homozygote ASB10-deficiency in an early embryonal state.
Conclusion: The reported ubiquitous expression of ASB10 fits the hypothesis of an association of ASB10 with ubiquitination and therefore intracellular degradation processes. With regard to the significance of ASB10 as a potentially glaucoma-associated gene, however, further examinations are required.

Untersuchungen zur gewebsspezifischen Expression von ASB10 in der Maus – Eine Reportergenanalyse

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