Kultivierung von Mäusenierenschnitten in einem 3D-in-vivo-Modell

URN zum Zitieren dieses Dokuments:: urn:nbn:de:bvb:355-epub-750669
DOI zum Zitieren dieses Dokuments:: 10.5283/epub.75066

Haller, Victoria

Lizenz: Creative Commons Namensnennung 4.0 International
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(7MB)

Veröffentlichungsdatum dieses Volltextes: 17 Feb 2026 05:33

Details

Dokumentenart:	Hochschulschrift der Universität Regensburg (Dissertation)
Open Access Art:	Primärpublikation
Datum:	17 Februar 2026
Begutachter (Erstgutachter):	Prof. Dr. Silke Härteis
Tag der Prüfung:	17 Februar 2025
Institutionen:	Biologie und Vorklinische Medizin > Institut für Anatomie > Professur für Molekulare und Zelluläre Anatomie - Prof. Dr. Silke Härteis
Stichwörter / Keywords:	Nierenkulturtechnik; Chorionallantoismembran-Modell; in-vivo-Modell
Dewey-Dezimal-Klassifikation:	600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften > 610 Medizin
Status:	Veröffentlicht
Begutachtet:	Ja, diese Version wurde begutachtet
An der Universität Regensburg entstanden:	Ja
Dokumenten-ID:	75066

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Zusammenfassung (Deutsch)

Zusammenfassung (Deutsch)

Das sog. Chorionallantoismembran-Modell (CAM-Modell) stellt eine Alternative zum klassischen Tierversuch dar und bietet neue Untersuchungsmöglichkeiten nephrologischer Fragestellungen. Für die Kultivierung embryonaler Mäusenieren wird das Modell bereits eingesetzt, adulte Mäusenieren ex vivo in Kultur zu halten, ist bisher nur für einige Stunden möglich – gleichwohl es wertvoll wäre, auf diese Weise pathophysiologische Mechanismen verschiedener Formen der Nierenschädigung zu untersuchen.
Ziel der Arbeit war es, Bedingungen zu schaffen, unter denen adultes Mäusenierengewebe über einen längeren Zeitraum außerhalb des Organismus am Leben gehalten werden kann, um physiologische Prozesse am vitalen Gewebe zu untersuchen.
Insgesamt wurden hunderte Schnitte von Nieren gesunder, adulter Mäuse für mehrere Tage auf der CAM kultiviert und unterschiedliche Abdeckungen (z. B. Aclarfolie, Kollagen, Cellophan, Schwamm und Vlies) sowie verschiedene Medien und Wachstumsfaktoren verglichen. Zudem wurden täglich Schnitte entnommen, um morphologische Veränderungen über den Zeitraum einer Woche zu beurteilen. Die Auswertung erfolgte histologisch anhand verschiedener Färbungen sowie durch eine eigens etablierte semiquantitative Beurteilung des Schädigungsausmaßes des renalen Gewebes anhand histomorphologischer Kriterien (z. B. Zellularität und Zellkernveränderungen).
Es konnten die Versuchsbedingungen so weit optimiert werden, dass auch nach einer Woche eine deutlich verbesserte Vitalität des Nierenparenchyms im HE-Präparat vorlag. Als geeignete Abdeckung erwiesen sich eine Cellophanfolie, die täglich zur Behandlung mit dem Nährmedium gewechselt wird bzw. ein dünnes Vlies. Beide Abdeckungsformen sorgten dafür, das Gewebe vor Austrocknung zu schützen und eine konstante Nährstoffversorgung über den Versuchszeitraum aufrechtzuerhalten. Die HE-Präparate zeigten, verglichen mit den anderen Abdeckungen, einen besseren Erhalt der glomerulären und tubulären Zellkerne und Zellstrukturen. Ohne Abdeckung erschien eine Versuchsdauer von 5 Tagen für einen minimalen Schaden optimal, mit entsprechender Abdeckung könnte sich der Zeitraum weiter verlängern.
Mit dem in dieser Arbeit optimierten Protokoll kann das CAM-Modell als in vivo Kultivierungsmethode für adulte Mäusenieren ein breites Spektrum an nierenbezogenen Fragestellungen eröffnen.

Übersetzung der Zusammenfassung (Englisch)

The so called chorionallantoic membrane model (CAM model) is an alternative to classic animal experiments and offers new possibilities for investigating nephrological issues. The model is already used for the cultivation of embryonic mouse kidneys, but keeping adult mouse kidneys in culture ex vivo is only possible for a few hours - although it would be valuable to investigate pathophysiological mechanisms of various forms of kidney damage in this way.
The aim of this work was to create conditions under which adult mouse kidney tissue can be kept alive outside the organism for a longer period of time in order to investigate physiological processes in vital tissue.
Hundreds of kidney slices from healthy adult mice were cultured on the CAM for several days and different coverings (e.g. aclarfoil, collagen, cellophane, sponge and fleece) as well as different media and growth factors were compared. In addition, sections were taken daily to assess morphological changes over a period of one week. The evaluation was carried out histologically using various stains and a specially established semiquantitative assessment of the extent of damage to the renal tissue using histomorphological criteria (e.g. cellularity and changes to the cell nucleus). The test conditions were optimised to such an extent that the vitality of the kidney parenchyma in the HE preparation was significantly improved even after one week. A cellophane film, which is changed daily for treatment with the culture medium, or a thin fleece proved to be a suitable cover. Both forms of cover ensured that the tissue was protected from drying out and a constant supply of nutrients was maintained over the test period. The HE preparations showed better preservation of the glomerular and tubular cell nuclei and cell structures compared to the other coverings. Without covering, a test period of 5 days appeared to be optimal for minimising damage; with appropriate covering, the period could be extended further.
With this optimised protocol, the CAM model as an in vivo cultivation method for adult mouse kidneys can open up a broad spectrum of kidney-related questions.

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