Cdc123-vermittelte Assemblierung des Translationsfaktors eIF2: Mechanismus und Bedeutung

Um den Mechanismus zu bestimmen mit dem das ATP-grasp-Protein Cdc123 den hetero-trimeren eIF2 Komplex assembliert, werden wir die genetische und biochemische Charakterisierung von mutierten Versionen des Cdc123-Proteins der Hefe fortsetzen, mit spezialisierten NMR-Methoden die Assoziation und Dynamik von Proteinen untersuchen, mittels SILAC-Massenspektrometrie nach einer kovalenten Modifikation von eIF2 suchen und die Assoziation von eIF2 mit der Initiator-tRNA in vivo mittels RNA-Immunpräzipitation analysieren. Um den anti-proliferativen Effekt zu verstehen, der mit einer chronischen Dysfunktion von Cdc123 und eIF2 einhergeht, werden wir mit Hilfe von RNA-Sequenzierung Profile der Genexpression, insbesondere der mRNA-Translation erstellen.